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2022-12-03
更新時間:2022-06-07 11:00:33作者:佚名
hepes緩沖液的配制方法是:準確稱取HEPES 2.383g,加入新鮮三蒸水定容至1L。過濾除菌,分裝后4℃保存(用于加入細胞培養(yǎng)液中作緩沖劑時,培養(yǎng)液需要避光保存)。Hepes緩沖液的用途:對細胞無毒性作用。Hepes緩沖液是一種氫離子緩沖劑,能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L,培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。
配制方法如下:
1、500ml 1 M Hepes,pH=7.0 Stock solution的配制。
119.15 g Hepes溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M的NaOH水溶液調節(jié)至所需pH(Hepes的有效pH范圍是6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。
2、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)。
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH水溶液調節(jié)pH值,最后定容。
3、2×Hepes緩沖鹽溶液的配制。
將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4、2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g Hepes溶解在90ml的蒸餾水,用0.5M NaOH調節(jié)至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。