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　　（一）細(xì)菌學(xué)檢查

　　1．病料采納生前可于部分穿刺采納水腫液。身后除采納部分水腫液及壞死安排外，還要采納肝、脾、腎、肺及汗水，尤以肺臟含菌較多。

　　2．涂片、鏡檢將水腫液、汗水、臟器等制作涂片，肝臟外表作觸片，天然枯燥、火焰固定后，用革蘭染色法染色鏡檢。

　　本菌是在肝外表及漿膜觸片染色標(biāo)本中，菌體構(gòu)成微曲折的長絲狀，這一形態(tài)特征在確診上具有很重要的意義。芽孢較菌體大，呈卵圓形，坐落菌體中心或近端。能運(yùn)動，無莢膜，革蘭染色陽性。

　　3．細(xì)菌別離培育 采納部分水腫液或尸身的肝臟安排，放于肝片肉湯中，置37℃恒溫箱中培育，24h肝片肉湯出現(xiàn)混濁，有沉積。經(jīng)3-4d后，取沉積物0.1 - 0.5mL，接于肝片肉湯中，于80℃溫水中30min后取出，冷卻后置于37℃溫箱中培育，待充沛發(fā)育后使用一般瓊脂斜面培育，經(jīng)證實無需氧菌稠濁時，使用血液葡萄糖瓊脂平板進(jìn)行厭氧別離培育，當(dāng)見有呈彎曲長絲狀、柔嫩花邊樣菌落，并有溶血環(huán)時，能夠開始認(rèn)為是糜爛梭菌。

　　4．動物感染實驗 取部分水腫液或尸身肝臟安排制成5-10倍懸液，或用肝片肉湯培育物0.1-0.2mL，接種于豚鼠股部肌肉，18-24h豚鼠逝世，打針部位發(fā)作嚴(yán)峻出血性水腫，肌肉濕潤，呈鮮紅色，部分水腫液涂片鏡檢，發(fā)現(xiàn)有兩端鈍圓的大桿菌。肝外表觸片鏡檢，見有長絲狀大桿菌時，即可確診。

　　5．熒光抗體染色法（直接法） 取肝臟外表觸片數(shù)張，先用丙酮固定10min，再經(jīng)磷酸鹽緩沖液浸洗2 - 3min后，放人事先墊有浸濕濾紙，并在恒溫箱內(nèi)預(yù)熱至3 7℃的大培育皿中，再滴加糜爛梭菌的熒光抗體數(shù)滴于標(biāo)本片上，蓋上皿蓋，作用30min，取出，將標(biāo)本片先后在兩個盛有磷酸鹽緩沖液的小缸內(nèi)各浸洗5 - 7min，干后滴緩沖甘油（無水甘油9份，緩沖液1份）1滴，蓋上蓋玻片，于熒光顯微鏡下查看，如見有艷麗的黃綠色無關(guān)節(jié)長絲狀菌體，即可確診。

　　取病料，然后接種于肉肝湯，在3 7 ℃厭氧培育24- 48h，純化后進(jìn)行牛乳發(fā)酵實驗來鑒定產(chǎn)氣莢膜梭菌，牛乳培育基的“猛烈發(fā)酵”是產(chǎn)氣莢膜梭菌最杰出的生化特性，肉肝湯中5 - 6h即呈均勻污濁，并發(fā)生很多氣體，接種培育于牛乳培育基中8- 10h后，牛乳即被酸凝結(jié)，同時發(fā)生很多氣體，使凝塊變成多孔的海綿狀，嚴(yán)峻時被沖成數(shù)段，乃至噴出管外。糜爛梭菌在牛乳中產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，緩慢凝結(jié)牛乳。